Die COVID-19-Pandemie geführt hat, die in über 2,5 Millionen bestätigte Fälle weltweit und knapp über 170.000 Todesfälle April 21 gemäß der Welt-Gesundheits-Organisation. Die frühzeitige Identifikation von potenziellen Patienten und Diagnose, gefolgt von isolation sind entscheidend für die Steuerung der aktuellen Pandemie und die Abflachung der Kurve. Diese Studie zeigt eine neuartige Methode, können dezentrale Anlagen zu liefern, schneller test-services für COVID-19 um mehr Menschen, berichtet das Journal of Molecular Diagnostics.
Diagnostische Tests für SARS-CoV-2, die verursachenden viralen Erreger von COVID-19, ist entscheidend zu erkennen, das virus, das Verständnis Ihrer Epidemiologie, Information case management, und das unterdrücken der übertragung. Diagnose derzeit setzt vor allem auf Methoden wie RT-rTQ-PCR (reverse Transkription quantitative PCR), aber Ihre Kapazität ist begrenzt durch die Verfügbarkeit von high-level Einrichtungen und Instrumente.
Studienleiter Jin-Soo Maeng, Ph. D., Zentrum für Konvergente Forschung von Emerging Virus-Infektion, Korea Research Institute of Chemical Technology, Daejeon, und die Research Group Food Processing, Korea Food Research Institute, Wanju-gun, Republik Korea (Südkorea), und Kollegen entwickelt und evaluiert RT-LAMP (reverse transcription loop-mediated Isothermische Amplifikation) Assay zum Nachweis von genomischer RNA (Ribonukleinsäure) des SARS-CoV-2. RT-LAMPE ist eine one-step nucleic acid amplification-Methode, die verwendet wird, für die Diagnostik von Infektionskrankheiten durch Bakterien oder Viren verursacht.
Die Ermittler erste gestaltete LAMPE primer-sets targeting genomische Regionen, die spezifisch für SARS-CoV-2 im Vergleich zu anderen humanpathogenen Coronaviren. Durch die anschließende screening für die Empfindlichkeit und Reaktionszeit, fanden Sie zwei vielversprechende LAMPE primer-sets. Sie dann optimierte RT-LAMPE Reaktionen für jedes der beiden sets und bewertet die Nachweisgrenze und Spezifität zu anderen Coronaviren.
Das RT-LAMP-assays in dieser Studie waren in der Lage, zu erkennen, so niedrig wie 100 Exemplare der SARS-CoV-2-RNA. Kreuz-Reaktivität von RT-LAMP-assays zur anderen menschlichen Coronaviren wurde nicht beobachtet. Die primer-sets wurden als Ausgangspunkt und gepaart mit Kristall-Violett kolorimetrische Detektion, die kann erhöhen den prüfdurchsatz. Die Reaktion kann durchgeführt werden und interpretiert mit einem sehr einfachen instrument wie einem Trockenofen oder Wasser-Badewanne. Die Leistung des assays können weiter modifiziert werden durch die Annahme von anderen Nachweismethoden und andere Enzym-Systeme.
„Isotherme nucleic acid amplification tests, wie RT-LAMPE haben das Potenzial für den Einsatz am point-of-care, die mit der Empfindlichkeit vergleichbar ist mit der aktuellen RT-qPCR-tests“, sagte Dr. Maeng. „Obwohl die richtige Extraktion der Probe RNA ist weiterhin erforderlich, unsere RT-LAMP-Verfahren hat das Potenzial, um in der dezentralen test-Einrichtungen, um schneller test-Dienstleistungen, um mehr Menschen.“
„Obwohl die RT-rTQ-PCR ist der Goldstandard für den Nachweis von Krankheitserregern, die aufgrund Ihrer hohen Sensitivität und Spezifität, gibt es immer noch einige Nachteile mit sich,“ erklärt Dr. Maeng. Die „zentrale Prüf-Laboratorien, die mit Einrichtungen wie, eine zuverlässige Versorgung mit Strom, teure Instrumente und geschultes Personal, erforderlich sind, um korrekte Durchführung der RT-qPCR-tests. Idealerweise screening-tests werden nicht nur sensible, sondern auch einfach und schnell, so dass Sie können durchgeführt werden, am point-of-care. Das Hauptziel unserer Forschung war die Identifizierung einer Methode, die mit hohem diagnostischen potential operieren in dezentralen Einrichtungen.“